Giemsa festett paraziták

A vérképzés alakos elemeinek morfológiai vizsgálata

A fehérvérsejtek vizsgálata után megbecsüljük a vérlemezkék számát és vizsgáljuk azok morfológiáját. Cytokémiai eljárások A vérkenet sejtjeinek cytokemiai vizsgálatával, a különböző sejtvonalak jobban felismerhetők és elkülöníthetők egymástól, mint a May-Grünwald-Giemsa festéssel. Ezek közül a gyakrabban alkalmazottak: Peroxidase: A neutrophil és az eosinophil granulocyták nagy mennyiségben tartalmaznak egy enzimet, a myeloperoxidaset, amely enzim nem mutatható ki a lymphocytákban és a vörösvérsejt előalakokban.

A reakció alapja a benzidin hydrogenperoxid által történő oxidációja, ami rézszulfát jelenlétében kékeszöld elszíneződést eredményez újabban - a benzidin feltételezett carcinogen hatása miatt - más anyagokat is használnak.

Az orvosi mikrobiológia tankönyve

Aspecificus esterase: A szubsztrát alpha-naphtyl butirat, a reakció a perifériás vér magvas elemei közül a monocytákban pozitív kisebb mértékben az aktivált T lymphocytákban. A csontvelői sejtek közül a histiocyták, a macrophagok és a megakaryocyták adnak pozitív reakciót.

Acid phosphatase: Valamennyi haemopoeticus sejtben jelen van. Kimutatására számos módszer szolgál. Tartarát rezisztens izoenzim jelenléte leukémiás sejtekben hajassejtes leukémiára utal.

Szövettani vizsgálatok metodikája

Csaknem valamennyi haemopoeticus sejt tartalmazza, de változó mennyiségben és elrendeződésben, így a reakció - bizonyos határok között - alkalmas azok egymástól való elkülönítésére.

Granulocyta alkalikus phosphatase GAP : Több haemopoeticus sejtben előforduló enzim. A granulocytákban változó mennyiségben van jelen. A sejtenkénti aktivitást a cytokémiai reakció elvégzését követő mikroszkópos vizsgálat során számokkal jelölik. Normál érték: Berlini kék reakció: A vas a sejteken belül ferritin vagy haemosiderin formájában raktározódik, és a reagensben lévő savanyú ferrocyanid ionokhoz kötődve kékeszöld szemcsék formájában látható a kenetben.

Az eljárás felhasználható a vas kimutatására magvas vörösvérsejtekben sideroblastok és a histiocytákban reticuloendothelialis giemsa festett paraziták. A vizsgálat végzésére elsősorban a csontvelő kenetek alkalmasak. Immuncytologiai eljárások Immunocytokemiai eljárások Immunofluorescens festések: Az egyes sejtek felszínén előforduló antigének markerek kimutatására és ezáltal a sejtek differenciálására szolgáló eljárás. A direkt módszerrel az antigént fluorochrommal jelölt antitesttel azonosítjuk - fluorescens mikroszkóp alatt ,-míg az érzékenyebb indirekt módszer alkalmazásakor a jelzetlen elsődleges antitestet visszük fel a sejtekre.

A fluorochromhoz kötött giemsa festett paraziták antitestet anti-immunoglobulinmely az elsődleges antitesthez kötődik, ez után alkalmazzuk.

A technikákat leggyakrabban suspendált sejtek vizsgálatára alkalmazzák fluorescens mikroszkóppal vagy "flow cytometer"-rel, amely műszer a sejtpopulációkat monochromaticus laser sugarat szóró tulajdonságuk alapján különíti el. Ez a sejtek nagyságától, granuláltságától és - a fenti eljárások alkalmazása esetén - a felszínükön elhelyezkedő antigének által megkötött antitestektől függ.

A csontvelő alakos elemeinek vizsgálata

Immunoenzimatikus eljárások: Giemsa festett paraziták kenetek giemsa festett paraziták az immuno-alkalikus phosphatase IAP technika vált a legelterjedtebbé. Az eljáráskor a specifikus antitestet nem fluoreszkáló festékkel, hanem egy enzimmel - jelen esetben ez az alkalikus phosphatase - jelölik.

A kötődés helyét és mértékét az enzim substratjának hozzáadása és megfelelő festés után fénymikroszkóppal lehet meghatározni. A csontvelő alakos elemeinek vizsgálata A csontvelő cytologiai vizsgálata Kenetkészítés A csontvelő cytologiai vizsgálata kenet készítésével válik lehetővé.

RÁD TELEPSZENEK! - Élősködők kritika

A kenethez szükséges vizsgálati anyagot felnőttnél valamelyik lapos csontból a sternum corpusából ill. Tekintettel arra, hogy a különböző haemopoeticus sejtek egymáshoz való aránya a csontvelő különböző területein hasonló, az egy helyről nyert vizsgálati anyag bizonyos határok között az egész velőállományt reprezentálja a ritka gócos elváltozások kivételével.

Az aspirátumot - mely vért és zsírba ágyazott kisebb-nagyobb mm velőrészeket tartalmaz - többféle módon kenhetjük ki, fontos az, hogy a sejtek egymástól jól elkülönüljenek. Szükséges tehát, hogy a kenet elég vékony legyen, de a kikenéskor a sejtek nem szabad sérüljenek, s a haemopoeticus sejtek vérrel való keveredését is el kell kerülni. Rutin festési eljárások A csontvelő kenetet rutin célokra ugyanazokkal az eljárásokkal festhetjük, mint a perifériás vérkenetet.

Tekintettel arra, hogy ezek a kenetek általában vastagabbak, mint a vérkenetek, festésük valamivel hosszabb időt vesz igénybe. A kenet mikroszkópos vizsgálata A May-Grünwald-Giemsa módszerrel festett kenetben kisebb nagyításokkal vizsgáljuk a velő sejtdússágát, a zsír és a vérképző sejtek mennyisége közötti arányt és a megakaryocyták számát.

Giemsa festett paraziták nagyítással vizsgáljuk az egyes vérképzőrendszerek granulopoesis, erythropoesis, lymphoplasmocellularis rendszer magvas elemeinek százalékos megoszlását, illetve az egyes rendszereken belül a fiatalabb és érettebb alakok egymáshoz való arányát myelogram.

A számbeli viszonyok mellett vizsgáljuk az esetleges morfológiai eltéréseket, a giemsa festett paraziták, illetve plazma atypiákat pl. A csontvelő histologiai vizsgálata Giemsa festett paraziták vizsgálathoz a spina iliaca anterior superiorból vagy posterior superiorból nyerhetünk biopsiás anyagot giemsa festett paraziták erre a célra gyártott speciális tűvel.

A biopsia eredménye egy kb 2x mm nagyságu szövethenger, mely a csontvelőt a csont szivacsos állományába ágyazva tartalmazza. A praeparatumból szövettani metszeteket készítenek és azokat mikroszkóp alatt giemsa festett paraziták. A biopsia előnye az aspiratioval szemben, giemsa festett paraziták olyan eltéréseket is kimutathatóvá tesz, melyek aspiratioval nem kórismézhetők pl osteomyelosclerosis.

• A hörgők helmintikus inváziója
• Belfereg bortunetei
• Az orvosi mikrobiológia tankönyve | Digitális Tankönyvtár
• Reflux giardiasis

Lehetővé teszi továbbá az egyes elemek elhelyezkedésének megállapítását a csont szerkezetén belül, ami pl férgek kezelése receptek lymphomák diagnosztikájában lehet fontos. Kimutathatóvá tesz olyan sejteket, melyek aspiratioval nem távolíthatók el helyükről és így nem vizsgálhatók pl hajassejtes leukaemiában vagy szolid tumorok csontvelői áttéteinél stb.